辅导8 基因定位

　　人类基因定位和基因连锁图的绘制是当今医学遗传学领域发展最快最活跃的方面，近年来已经取得重大突破，其在致病基因的鉴定与克隆、遗传病基因病理、诊断、防治肿瘤研究等方面意义重大。

　　基因定位就是通过适当的方法把发现的基因在特定染色体上的位置准确地标定下来。根据大量的基因定位数据，可以把每一条染色体上已发现的基因位点绘制成基因图。这也是近年来人类基因组计划正在进行的工作。

　　遗传图谱是指基因或DNA标志在染色体上的连锁关系及其相对距离。基因或DNA片段之间的相对距离是以它们在减数分裂中的重组率来表示的。相对距离越大，基因交换和重组的概率就越高。

　　物理图谱是指DNA序列上两个位点之间的实际距离，是以两个位点相距的碱基对数为衡量标准。这是DNA分子水平上的基因制图，通常由DNA的限制酶片段和克隆的DNA片段有序排列而成。

　　进行基因克隆先要建立基因文库，包括基因组文库和cDNA文库。

　　用选定的限制酶把基因组DNA不完全水解，得到许多大小不等的随机DNA片段，将这些片段与载体DNA重组后转染宿主菌，当培养后得到的克隆嗜菌斑菌落多达可以把全部基因组DNA顺序包含在内时，这一组DNA克隆的总体就称为这种细胞的基因组文库。

　　从体细胞总RNA中分离、收集总mRNA，以这些mRNA为模板，在逆转录酶的作用下互补合成cDNA，与载体DNA重组后转化宿主菌，当培养后得到的克隆菌落数多达可以把全部mRNA的顺序包含在内时，这一组cDNA克隆的总体就称为这种细胞的cDNA文库。

　　基因定位的主要方法是家系分析法、体细胞杂交法、克隆嵌板法、原位杂交法、DNA多态性连锁分析法。

　　本章要求掌握的概念：

　　基因定位、遗传图谱、物理图谱、基因组文库、cDNA文库